Hydroxystilbamidine (FluoroGold) 羥芪巴脒（熒光金）

產(chǎn)品簡介：

羥芪巴脒（Hydroxystilbamidine），又稱為Fluoro-Gold?，用于DNA和RNA染色。與RNA作比較，與DNA結(jié)合后呈現(xiàn)出截然不同的熒光發(fā)射光譜。這一陽離子染料還常用作一種逆行神經(jīng)元示蹤劑。

產(chǎn)品特性：

1）CAS NO.：223769-64-0

2）化學(xué)名：4-[2-[4-(Aminoiminomethyl)phenyl]ethenyl]-3-hydroxybenzenecarboximidamide bis(methanesulfonate)

3）同義名：Hydroxystilbamidine bis(methanesulfonate); 2-Hydroxystilbene-4,4′-dicarboxamidine bis(methanesulfonate);Fluoro-Gold?;羥基司替丁雙（甲磺酸酯）；2-羥基二苯乙烯-4,4′-二羧氨基脒雙；熒光金；氟金?；

4）分子式：C18H24N4O7S2

5）分子量：472.54

6）外觀：黃色粉末

7）純度：≥95%（HPLC）

8）溶解性：溶于H2O

9）Ex/Em：360/625nm

10）化學(xué)結(jié)構(gòu)圖：

保存條件: 

-20℃干燥避光保存，有效期至少1年。

產(chǎn)品使用：（組織學(xué)染色）

羥芪巴脒的使用基本與其他熒光示蹤劑相同。主要區(qū)別是羥芪巴脒在染料注射后存活時間、工作濃度范圍、組織處理和與其他組織化學(xué)技術(shù)兼容性幾個方面更加靈活。比其他熒光示蹤劑更耐褪色、更明亮和更持久。

1.染料濃度

1-10%的羥芪巴脒都得以成功應(yīng)用。最先實(shí)驗(yàn)建議使用4%濃度。如果在注射位點(diǎn)發(fā)生不理想的壞死或標(biāo)記太強(qiáng)烈，將濃度降低到2%。

2.染料注射

①壓力注射：這可能是使用最頻繁的用法。注射體系范圍從0.05-1μl，典型為0.1-0.2μl。

②晶體：示蹤劑的晶體可從微量移液槍的槍尖注射。

3.固定

雖然任何固定或不做固定都可，但含4%多聚甲醛的PBS是最常使用的。含高濃度重金屬（比如：鋨，汞）的固定劑會淬滅熒光，而高濃度的戊二醛（＞1%）也許增加背景熒光。

4.組織化學(xué)處理

含羥芪巴脒的組織可能依照任何通用的組織學(xué)技術(shù)來作處理。固定組織的冰凍切片最常使用。

5.聯(lián)用技術(shù)

此處切片可能需進(jìn)一步處理來做第一種標(biāo)記比如放射性自顯影、HRP組織化學(xué)術(shù)、免疫細(xì)胞化學(xué)、第二種熒光示蹤劑、熒光復(fù)染等等。

6.裱貼、透化和蓋片

切片通常裱貼在明膠包被的載玻片、空氣干燥、浸在二甲苯內(nèi)，之后用非熒光的DPX封片劑來封片和蓋片。切片可能用分級純來脫水，除非這一步與第二種染料不兼容。如果羥芪巴脒與熒光免疫細(xì)胞化學(xué)組合，之后切片需空氣干燥，并且直接用DPX蓋片。

7.觀察和成像

羥芪巴脒（中性pH下激發(fā)為323nm，發(fā)射為620nm）可以用熒光顯微鏡（帶寬波帶的紫外激發(fā)濾片）來觀察。當(dāng)用中性pH緩沖液處理組織，發(fā)射光呈金色；而當(dāng)用酸性pH緩沖液（比如pH 3.3）處理組織時，發(fā)射光呈藍(lán)色?？梢杂脭?shù)碼機(jī)或膠片機(jī)拍攝（使用Ektachrome 200-400 ASA膠片進(jìn)行彩色打印，或相當(dāng)?shù)乃俣饶z片用于黑白打?。?。絕大多數(shù)曝光時間范圍從10~60s曝光，具體取決于物鏡放大倍數(shù)和標(biāo)記強(qiáng)度。30s曝光大概是平均的。多重曝光可能采用來同時觀察羥芪巴脒和另一個示蹤劑。因此，UV將與明場照明組合以同時定位羥芪巴脒和HRP或放射自顯影的銀粒。類似地，藍(lán)光激發(fā)也可能聯(lián)合使用同時觀察FITC的綠色發(fā)光，而綠色激發(fā)光也可能用于同時觀察碘化丙啶或溴化乙錠的紅色發(fā)光。

注意事項(xiàng)：

1.      Fluoro-Gold?是Fluorochrome, LLC.的注冊商標(biāo)。

2.      熒光染料都存在淬滅的問題，保存和操作過程中注意避光。

3.      為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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