英文名稱：Tissue Digestive Mix-I

貨號：C3501-0020，C3501-0100,

規(guī)格：20ml/瓶、100ml/瓶

價格：詢價

【預(yù)期用途】

用于從組織上消化原代干細胞，做后續(xù)細胞體外增值培養(yǎng)。培養(yǎng)后的細胞僅用于體外分析檢測，不作為治療使用。

【檢驗原理】

以特定酶自組織塊分離出原代間充質(zhì)干細胞是常見的細胞培養(yǎng)技術(shù)。組織消化液利用數(shù)種重組表達的消化酶制備而成，無動物源成分。組織消化液針對組織的細胞外基質(zhì)而設(shè)計, 不含胰酶，不會傷害細胞。可以有效地消化細胞外基質(zhì)，進而從組織塊 (臍帶、脂肪、胎盤) 分離出大量的原代間充質(zhì)干細胞，作為后續(xù)細胞增殖使用。

【主要組成成分】

由 DMEM -LG 基礎(chǔ)培養(yǎng)基、膠原脢、分散脢、脫氧核糖核酸酶組成。

【適用范圍】

收獲組織 (臍帶、脂肪、胎盤)的原代間充質(zhì)干細胞, 做后續(xù)細胞體外增殖培養(yǎng)。

【儲存條件及有效期】

應(yīng)貯存在-10~-20℃，有效期為1年。開封后存放4℃，注意避光，1周內(nèi)使用。不建議反復(fù)凍融。

【生產(chǎn)日期與失效日期】

詳見產(chǎn)品標簽。

【使用方法】

以臍帶組織為例

1. 將臍帶用DPBS  漂洗干凈，剪成1-50px大小，剔除血管。

2. 將組織塊剪成3-5mm3，移入50ml離心管，再加入適量的分離液。

* 一條長度10公分的臍帶建議加入10ml的分

離液；或者組織塊 : 分離液（vol）= 1:1。

** 視情況而定，可自行在分離液中添加1%青

鏈雙抗。

3. 把50ml離心管橫放在37度細胞培養(yǎng)箱，過夜反應(yīng)（16小時）。

* 若總反應(yīng)體積較大，也可持續(xù)旋轉(zhuǎn)混合。

4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA終止反應(yīng)后，1500 xg離心5分鐘，去除上清。

* 溶液比較濃稠，小心不要影響下層的細胞; 建

議留下5ml左右的溶液。

** 沒有EDTA, 可使用無鈣鎂DPBS取代。

5. 以和分離液等體積的無鈣鎂DPBS重懸細胞后，500 xg離心5分鐘，去除上清。

6. 再次以和分離液等體積的無鈣鎂DPBS重懸細胞后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

7. 用適量的培養(yǎng)基重懸細胞后，即可按常規(guī)細胞培養(yǎng)方法接種P0代細胞培養(yǎng)。

* 消化后的原代細胞，建議培養(yǎng)時接種密度提高

到10,000/cm2以上；傳代后即可按常規(guī)的接

種密度培養(yǎng) 。

以皮下脂肪組織塊為例

1. 以DPBS將新鮮的皮下脂肪組織塊漂洗干凈，剔除明顯的血管或血塊。

2. 將組織塊剪成3-5mm3，移入50ml離心管，再加入適量的分離液。

* 1克組織塊可加入約5ml分離液。

** 視情況而定，可自行在分離液中添加1%青鏈雙抗。

3. 把50ml離心管橫放在37度細胞培養(yǎng)箱，反應(yīng)4小時 (用戶也可自行調(diào)整反應(yīng)時間)。

 * 若總反應(yīng)體積較大，也可使用持續(xù)旋轉(zhuǎn)混合。

4. 加入和分離液等體積的0.05%EDTA

終止反應(yīng)后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

* 沒有EDTA, 也可使用無鈣鎂DPBS取代。

5. 以和分離液等體積的無鈣鎂DPBS重懸細胞后，

250 xg離心5分鐘，去除上清。

6. 再次以和分離液等體積的無鈣鎂DPBS重懸細

胞后，250 xg離心5分鐘，去除上清。

7. 用適量的培養(yǎng)基重懸細胞，再以100目的篩網(wǎng)

過濾細胞液后，即可按常規(guī)細胞培養(yǎng)方法接種

細胞培養(yǎng)。

* 消化后的原代細胞，建議培養(yǎng)時接種密度提高

到10,000/cm2以上；傳代后即可按常規(guī)的接

種密度培養(yǎng)。

【產(chǎn)品性能指標】

1.       pH值：7.0-8.0

2.       滲透壓（MOSM/KG）：310-345

3.       無菌檢測：無菌

4.       內(nèi)毒素（EU/ml）：＜10

5.       原代細胞分離實驗：＞80%

【注意事項】

1.       本品僅用于體外診斷，不用于臨床治療，嚴禁內(nèi)服，不能用嘴吸液。

2.    試劑包裝如有破損或滴漏，嚴禁使用。

3.    操作過程應(yīng)避免污染。

4.    操作人員萬一與皮膚、粘膜接觸，請立即用自來水沖洗。

5.    禁止使用超出規(guī)定有效期的產(chǎn)品。

【備案人/生產(chǎn)企業(yè)】

上海達特希爾生物科技有限公司

生產(chǎn)地址/住所：中國（上海）自由貿(mào)易試驗區(qū)祖沖之路 1505弄80號12幢3樓C，D區(qū)

郵政編碼：201203 

電話號碼：021-58785545

傳真號碼：021-58777053

【售后服務(wù)單位】

上海達特希爾生物科技有限公司

【產(chǎn)品技術(shù)要求編號】

滬浦械備20200167號

【醫(yī)療器械備案憑證編號】

滬浦械備20200167號

【生產(chǎn)備案憑證編號】

滬浦食藥監(jiān)械生產(chǎn)備20152128號

【說明書批準及修改日期】

2021年09月17日